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名稱描述內容

CF1001 Cryo-SFI無血清細胞凍存液

    發(fā)布時間: 2025-01-15 17:47    

產品特色

1.無血清,無動物源蛋白,有效避免病毒和支原體污染。

2.使用方便,凍存前無需程序降溫。

3.兼容-80度冰箱和液氮凍存。

4.兼容孔板(如96孔板、48孔板)和凍存管凍存。

產品質量:凍存周期長,細胞存活率高

 

 

產品應用

1.96孔板大規(guī)模快速微量凍存雜交瘤細胞株候選克隆

2.無血清凍存293和CHO穩(wěn)定細胞株

3.常規(guī)凍存?zhèn)鞔毎?/span>

使用方法

一、常規(guī)細胞冷凍保存方法【細胞凍存管法】

選擇凍存處于對數(shù)生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。

1.按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞,置于離心管中,細胞計數(shù)

2.離心收集培養(yǎng)細胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,RT, 3~5 min)

3.于離心管中加入適量的無血清細胞凍存液,使細胞濃度為5×105至5×106 cells/ml。緩慢地混合均勻,制成細胞混合液。

4.將細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中。

5.直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱,長期冷凍保存。

6.若研究者需要液氮保存時,可將完全凍結的凍存管(放入-80℃冰箱后至少一晝夜)移至-196℃液氮罐。

二、凍存細胞復蘇方法【細胞凍存管法】

1.從冰箱里取出細胞冷凍保存管,立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。

2.待細胞混合液完全融化后,立即加入1 ml細胞培養(yǎng)基與細胞混合,再將細胞混合液移入含有4倍體積細胞培養(yǎng)基的離心管中,混合均勻。

3.離心收集培養(yǎng)細胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,RT, 3~5 min),充分棄除離心上清。

4.加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基,進行混合和稀釋。

5.鏡檢后,研究者可根據各自方法和需要,調整細胞密度,進行細胞培養(yǎng)。

三、原位凍存法【孔板凍存法】

對于貼壁細胞:

1. 孔板中細胞生長狀態(tài)良好且匯合度達到50%以上時,從細胞培養(yǎng)板中將培養(yǎng)基上清小心吸取干凈。

2. 加入適量(體積根據孔板定,一般96孔板加100 ul, 48孔板加200 ul)無血清細胞凍存液于培養(yǎng)孔板中,充分浸潤細胞。

3. 蓋上蓋板,做好密封措施,防止染菌。

4. 直接將含凍存液的細胞培養(yǎng)板放入-80℃冰箱,長期冷凍保存。

對于懸浮細胞:

1. 孔板中細胞生長狀態(tài)良好且密度達到5×105至5×106 cells/ml時,用水平離心機離心(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,RT, 3~5 min),從細胞培養(yǎng)板中將培養(yǎng)基上清小心吸取干凈。

2. 加入適量(體積根據孔板定,一般96孔板加100 ul, 48孔板加200 ul)無血清細胞凍存液于培養(yǎng)孔板中,充分浸潤細胞。

3. 蓋上蓋板,做好密封措施,防止染菌。

4. 直接將含凍存液的細胞培養(yǎng)板放入-80℃冰箱,長期冷凍保存。

四、原位凍存復蘇方法【孔板凍存法】

對于貼壁細胞:

1.從冰箱里取出冷凍的細胞培養(yǎng)板,立即放入37℃培養(yǎng)箱中解凍。

2.待細胞凍存液完全融化后,將液體小心吸取干凈,立即加入適量細胞培養(yǎng)基。

3.置37℃,5%CO2培養(yǎng)箱常規(guī)傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞:

1.從冰箱里取出冷凍的細胞培養(yǎng)板,立即放入37℃培養(yǎng)箱中解凍。

2.待細胞凍存液完全融化后,用水平離心機離心(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,RT, 3~5 min),將液體小心吸取干凈,立即加入適量細胞培養(yǎng)基重懸細胞。

3.置37℃,5%CO2培養(yǎng)箱常規(guī)傳代培養(yǎng)。

產品保存

1.質量保障期從產品的生產日期起,為期1年。

2.短期保存于2-8℃,長期保存于-20℃。

3.為避免反復凍融影響產品性能,大包裝產品推薦分裝后,存放于-20℃?zhèn)溆?/span>



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