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名稱描述內容

MG501 MG502重組耐堿蛋白A磁珠 (ATPA Magnetic Beads)

    發(fā)布時間: 2025-01-22 17:16    

耐堿蛋白A磁珠(ATPA Magnetic Beads) 本產品將重組耐堿蛋白A (Recombinant Alkali-Tolerant Protein A)高密度環(huán)氧基偶聯(lián)到磁性瓊脂糖微球表面,具有高載量,高特異性,高回收率,低非特異吸附和強耐堿性的特性。可結合293/CHO細胞培養(yǎng)上清、雜交瘤細胞上清、小鼠腹水和血清等樣本中的IgG或帶有FC標簽的重組蛋白。重組ATPA只保留了Protein A中抗體特異結合的部分結構域,與Protein A相比,對樣品的純化效果幾乎不變,但對堿的耐受性大大提升,在重復使用時,極大地降低了樣品交叉污染的風險。



磁珠的參數和指標見Table 1,產品規(guī)格見 Table 2,溶液配方見Table 3。


Table 1:參數和性能指標

 

磁珠密度

0.95-1.05 g/mL純磁珠

磁珠濃度

380-580個/mg純磁珠

磁響應速度

≤ 45 s

粒徑

20-80um

ATPA偶聯(lián)方式

環(huán)氧基偶聯(lián)

載量

hIgG≥40 mg/ml(100%磁珠)

保存緩沖液

20%乙醇

保存溫度

2-8℃


Table 2:試劑和規(guī)格

 

產品名稱

試劑名稱

規(guī)格

數量

保存條件

ATPA Magnetic   Beads

10% v/v磁珠

10ml

1

2-8℃

10% v/v磁珠

50ml

1

2-8℃

使用須知

本產品須與磁性分離設備配套使用

磁珠使用前要混合震蕩均勻

磁珠預處理要充分

孵育時要保持磁珠處于懸浮狀態(tài),以保持最大結合效率

在使用及保存磁珠過程中,禁止磁珠長時間干燥

禁止冷凍,離心磁珠,防止對磁珠產生不可逆的損傷

建議磁珠僅重復純化同種蛋白

應避免磁珠因磁吸不完全導致的磁珠損耗

用后及時再生,避免將磁珠長時間置于低pH的緩沖液中,避免磁珠長菌



使用方法


樣品預處理

(以純化1ml小鼠腹水為例)

用Wash Buffer將小鼠腹水稀釋3-5倍。(細胞培養(yǎng)上清可使用Wash Buffer調節(jié)pH至7.0-8.0。)

磁珠預處理

顛倒混勻磁珠,吸取2mL 10%(v/v)磁珠于準備好的5ml EP管內,磁分離架收集磁珠并丟棄上清液;

加入1.8ml的Wash Buffer,磁分離架收集磁珠并丟棄上清液,重復2次;

如有控內毒的需要,請做下面兩個步驟:

加入1.8 ml 0.1M NaOH(Cleaning Buffer)孵育 15 分鐘。然后使用磁分離架收集磁珠并丟棄上清液,重復此步驟1次。

加入1.8ml的Wash Buffer,顛倒混勻1min,磁分離架收集磁珠并丟棄上清液,重復2次。

結合

將1ml小鼠腹水(pH7.0-8.0)用Wash Buffer稀釋3倍至4ml,加入至裝有磁珠的EP管中,顛倒混勻,室溫緩慢旋轉孵育1h(具體時間可根據結合效果調整)。

洗滌

將裝有磁珠跟樣本的EP管放置在磁力架上,靜置1min,吸棄上清,加入1.8ml Wash Buffer,顛倒混勻1min,靜置在磁力架1min,吸棄上清;

重復5次。

洗脫

加入3-5倍磁珠體積的Elution Buffer(600ul),室溫緩慢旋轉洗脫5min;

靜置在磁力架上,吸走上清,得到洗脫1;

再加入3-5倍磁珠體積的Elution Buffer(600ul),室溫緩慢旋轉洗脫5min;

靜置在磁力架上,吸走上清,得到洗脫2;

向洗脫的上清中加入1/10 Elution Buffer體積的Neutralization Buffer(60ul)。

分別測洗脫1和洗脫2的濃度,根據需要的抗體濃度決定是否混合。

磁珠再生

(以再生2ml 10%v/v磁珠為例)

(1)將磁珠置于磁力架上,吸棄上清,向EP管內加入與1.8ml Elution Buffer,室溫緩慢旋轉5min,靜置在磁力架上,吸棄上清;

(2)向EP管內加入與1.8ml的Cleaning Buffer,室溫緩慢旋轉15min,靜置在磁力架上,吸棄上清,重復此步驟1次;

(3)向EP管內加入與1.8ml的Wash Buffer,室溫緩慢旋轉2min,靜置在磁力架上,吸棄上清,重復一次;

(4)向EP管內加入1.8ml 20%乙醇,使磁珠的濃度保持在10% (v/v) ,4℃保存。




訂購信息



產品名稱

規(guī)格

貨號

rProtein A Magnetic Beads

10ml, 10%(v/v)

MG101

rProtein A Magnetic Beads

50ml, 10%(v/v)

MG102

rProtein G Magnetic Beads

10ml, 10%(v/v)

MG201

rProtein G Magnetic Beads

50ml, 10%(v/v)

MG202

Ni NTA Magnetic Beads

10ml, 10%(v/v)

MG301

Ni NTA Magnetic Beads

50ml, 10%(v/v)

MG302

Ni TED  Magnetic Beads

10ml, 10%(v/v)

MG401

Ni TED  Magnetic Beads

50ml, 10%(v/v)

MG402

ATPA Magnetic Beads

10ml, 10%(v/v)

MG501

ATPA Magnetic Beads

50ml, 10%(v/v)

MG502




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