知禾自主研發(fā)Cryo-SFI無血清細(xì)胞凍存液，具有獨(dú)特配方,，適用于各種動物細(xì)胞株（腫瘤細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞）,。該凍存液配方成分明確，無血清,，無動物源蛋白,，有效避免病毒和支原體污染，保證凍存細(xì)胞的安全。

產(chǎn)品應(yīng)用：

適用于凍存：293細(xì)胞,、CHO細(xì)胞,、雜交瘤細(xì)胞、干細(xì)胞,、免疫細(xì)胞,、腫瘤細(xì)胞和組織

產(chǎn)品優(yōu)勢：省時(shí)、高效,、方便,、快捷

1.無血清，細(xì)胞可懸浮培養(yǎng),，產(chǎn)品配方明確,，無動物源性污染；

2.兼容-80℃和液氮凍存,；

3.快速凍存,，無需梯度降溫；

4.高通量,、微量凍存：96孔板,、48孔板凍存

產(chǎn)品質(zhì)量：凍存周期長，細(xì)胞存活率高（>95%）

產(chǎn)品保存：

1.質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,，為期1年,。

2.短期保存于2-8℃，長期保存于-20℃,。

3.為避免反復(fù)凍融影響產(chǎn)品性能,，大包裝產(chǎn)品推薦分裝后，存放于-20℃?zhèn)溆谩?/span>

使用方法：

Ⅰ. 常規(guī)細(xì)胞冷凍保存方法【細(xì)胞凍存管法】

選擇凍存處于對數(shù)生長期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率,。

1. 按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞,，置于離心管中，細(xì)胞計(jì)數(shù),。

2. 離心收集培養(yǎng)細(xì)胞（參考離心條件：1,000~2,000 rpm，RT, 3~5 min）,。

3. 于離心管中加入適量的無血清細(xì)胞凍存液,，使細(xì)胞濃度為5×105至5×106 cells/ml。緩慢地混合均勻,，制成細(xì)胞混合液,。

4. 將細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中。

5. 直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱,，長期冷凍保存,。

6. 若研究者需要液氮保存時(shí)，可將完全凍結(jié)的凍存管（放入-80℃冰箱后至少一晝夜）移至-196℃液氮罐,。

Ⅱ. 凍存細(xì)胞復(fù)蘇方法【細(xì)胞凍存管法】

1. 從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍,。

2. 待細(xì)胞混合液完全融化后，立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基與細(xì)胞混合,，再將細(xì)胞混合液移入含有4倍體積細(xì)3. 胞培養(yǎng)基的離心管中,，混合均勻。

4. 離心收集培養(yǎng)細(xì)胞（參考離心條件：1,000~2,000 rpm,，RT, 3~5 min）,，充分棄除離心上清。

5. 加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,，進(jìn)行混合和稀釋,。

6. 鏡檢后，研究者可根據(jù)各自方法和需要,，調(diào)整細(xì)胞密度,，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

Ⅲ. 原位凍存法【孔板凍存法】

（1）對于貼壁細(xì)胞：

1. 孔板中細(xì)胞生長狀態(tài)良好且匯合度達(dá)到50%以上時(shí),，從細(xì)胞培養(yǎng)板中將培養(yǎng)基上清小心吸取干凈,。

2. 加入適量（體積根據(jù)孔板定，一般96孔板加100ul, 48孔板加200 ul）無血清細(xì)胞凍存液于培養(yǎng)孔板中,，充分浸潤細(xì)胞,。

3. 蓋上蓋板，做好密封措施,，防止染菌,。

4. 直接將含凍存液的細(xì)胞培養(yǎng)板放入-80℃冰箱，長期冷凍保存,。

（2）對于懸浮細(xì)胞：

1. 孔板中細(xì)胞生長狀態(tài)良好且密度達(dá)到5×105至5×106cells/ml時(shí),，用水平離心機(jī)離心（參考離心條件：1,000~2,000rpm，RT, 3~5 min）,，從細(xì)胞培養(yǎng)板中將培養(yǎng)基上清小心吸取干凈,。

2. 加入適量（體積根據(jù)孔板定，一般96孔板加100ul, 48孔板加200 ul）無血清細(xì)胞凍存液于培養(yǎng)孔板中,，充分浸潤細(xì)胞,。

3. 蓋上蓋板，做好密封措施,，防止染菌,。

4. 直接將含凍存液的細(xì)胞培養(yǎng)板放入-80℃冰箱，長期冷凍保存,。

Ⅳ. 原位凍存復(fù)蘇方法【孔板凍存法】

（1）對于貼壁細(xì)胞：

1. 從冰箱里取出冷凍的細(xì)胞培養(yǎng)板,，立即放入37℃培養(yǎng)箱中解凍。

2. 待細(xì)胞凍存液完全融化后，將液體小心吸取干凈,，立即加入適量細(xì)胞培養(yǎng)基,。

3. 置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱常規(guī)傳代培養(yǎng),。

（2）對于懸浮細(xì)胞：

1. 從冰箱里取出冷凍的細(xì)胞培養(yǎng)板,，立即放入37℃培養(yǎng)箱中解凍。

2. 待細(xì)胞凍存液完全融化后,，用水平離心機(jī)離心（參考離心條件：1,000~2,000rpm,，RT, 3~5 min），將液體小心吸取干凈,，立即加入適量細(xì)胞培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。

3. 置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱常規(guī)傳代培養(yǎng),。